融合PCR操作步骤（利用融合PCR连接两个片段）

第一步：（不加引物）

dNTPs 1μl

10×Buffer 2.5μl

Template DNA （A和B） 各1μl

Taq 酶 0.5μl

RNaseA-free H2O 19μl

Total 25μl

循环参数：95℃预变性 5min，94℃变性 20s、57℃退火 20s、72℃延伸 40s 进行 10个循环，72℃延伸 5min。

如上图第二步：（第一步不需要添加引物，因为让A和B片段具有互补片段，可以互为引物扩增）

方法/步骤4: